中藥藥品毒理學(xué)檢驗檢測

近年來(lái)，隨著(zhù)中藥的不良反應事件報道的增多，中藥毒性問(wèn)題已經(jīng)越來(lái)越受到關(guān)注。研究中藥藥物的有害作用及機制，目的是指導臨床合理用藥，降低藥物不良反應以及減少因藥物毒性導致的新藥開(kāi)發(fā)失敗。中藥毒性的研究主要是從中藥有毒成分、配伍、毒性評價(jià)指標、動(dòng)物選擇等方面展開(kāi)；大多數為嚙齒類(lèi)動(dòng)物和非嚙齒類(lèi)動(dòng)物的急性毒性和長(cháng)期毒性實(shí)驗，以及特殊毒性和靶器官毒性。

中科檢測能夠開(kāi)展中藥藥品毒理學(xué)檢驗檢測，除了對中藥飲片、中藥復方和中成藥的毒性成分、劑量、毒性機制進(jìn)行研究外，還更多考慮中藥炮制、配伍對毒性的影響。中科檢測動(dòng)物毒理試驗中心，建立科學(xué)的毒理檢測質(zhì)量保障體系，開(kāi)展給藥毒性試驗、局部毒性試驗、免疫原性試驗、安全性藥理試驗、生殖毒性試驗、遺傳毒性試驗、毒代動(dòng)力學(xué)試驗等。

中藥藥品毒理學(xué)檢驗檢測項目

單次給藥毒性試驗（又稱(chēng)急性毒性試驗）：嚙齒類(lèi)和非嚙齒類(lèi)

I.定義：指藥物在單次或者24H內多次給予后一定時(shí)間內動(dòng)物所產(chǎn)生的毒性反應研究，其試驗核心在于觀(guān)察動(dòng)物給藥后出現的毒性反應。

II.意義：①對初步闡明藥物的毒性作用和了解其毒性靶器官具有重要作用。

②對長(cháng)期毒性試驗的劑量設計具有直接參照作用。

③對后期人體臨床試驗的起始劑量的選擇有參考意義。

III.動(dòng)物要求：至少采用嚙齒類(lèi)和非嚙齒類(lèi)的兩種哺乳動(dòng)物，通常采用兩種性別的健康成年動(dòng)物，雌雄各半。

IV.試驗方法：應根據受試藥物的特點(diǎn)，經(jīng)過(guò)預實(shí)驗選擇合適的劑量，原則上給藥量應包括從未見(jiàn)毒性反應的劑量到出現嚴重毒性反應的劑量或達到最大給藥量，常用的試驗方法有近似致死量法，最大給藥量法；最大耐受量法；固定劑量法；半數致死量法；累計劑量法（金字塔法）等。

V.試驗內容：

①給藥后按試驗設計采血或組織進(jìn)行分析，研究暴露量與時(shí)間之間關(guān)系。

②試驗動(dòng)物一般連續觀(guān)察至少14d,觀(guān)察毒性反應的癥狀以及出現，恢復以及死亡時(shí)間，常見(jiàn)的觀(guān)察指征包括⑴臨床癥狀（動(dòng)物外觀(guān)；行為；飲食；對刺激的反應；分泌物；排泄物）⑵死亡情況（時(shí)間和瀕死反應）⑶體重變化（給藥前和給藥后觀(guān)察期）

③動(dòng)物安.樂(lè )死后進(jìn)行大體解剖并進(jìn)行組織病理學(xué)檢查，判斷毒性靶器官。

反復給藥毒性試驗（又稱(chēng)長(cháng)期毒性試驗）：嚙齒類(lèi)和非嚙齒類(lèi)

I.定義：指觀(guān)察動(dòng)物重復給藥后所產(chǎn)生的毒性反應，是非臨床安全評價(jià)中綜合性*，獲得信息最多和對臨床指導意義最大的一項毒理試驗。(由于試驗周期長(cháng)，耗資大，為減少盲目性，通常在經(jīng)藥理試驗和急毒試驗或預實(shí)驗后，在確認試驗藥物有進(jìn)一步研究?jì)r(jià)值時(shí)才進(jìn)行)

II.意義：

①預測藥可能引起的臨床不良反應，為臨床不良反應監測和防治解救提供參考。

②判斷藥物重復給藥的毒性靶器官和靶組織。

③確定未觀(guān)察到臨床不良反應的劑量水平（NOAEL）,將結果外推至人體，計算第一次人體臨床試驗（FIH）的起始劑量，為后續臨床試驗提供安全劑量范圍。

III.動(dòng)物要求：通常采用嚙齒類(lèi)和非嚙齒類(lèi)的兩種哺乳動(dòng)物，通常用大鼠和比格犬或猴，一般選擇正常，健康和性成熟動(dòng)物，必要時(shí)選用疾病動(dòng)物模型進(jìn)行試驗，

IV.試驗設計：

①給藥期至少設低中高三個(gè)劑量組，以及一個(gè)溶媒或輔料對照組，高劑量原則上使動(dòng)物產(chǎn)生明顯毒性反應，低劑量原則上相當于或高于動(dòng)物藥效劑量或臨床使用量的等效劑量。中劑量結合毒性作用機制和特點(diǎn)介于兩者之間。

②設置恢復期，恢復期長(cháng)短依據藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)和靶器官毒性反應和恢復情況確定，一般不少于4周，在給藥介紹后對部分動(dòng)物繼續開(kāi)展恢復期觀(guān)察，以了解毒性反應的可逆性和可能出現的遲發(fā)毒性。

③給藥途徑一般應與臨床擬用途徑保持一致。

④長(cháng)毒試驗時(shí)間一般根據臨床給藥療程決定，例如臨床給藥療程為2周時(shí)，需要進(jìn)行1個(gè)月的動(dòng)物長(cháng)毒試驗以支持藥物上市申請，若給藥療程為2周至1個(gè)月時(shí)，則需要進(jìn)行3個(gè)月的動(dòng)物長(cháng)毒試驗。

V.試驗內容：

①給藥后按試驗設計采血或組織進(jìn)行分析，研究暴露量與時(shí)間之間關(guān)系。

②觀(guān)察毒性反應的癥狀，常見(jiàn)的觀(guān)察指征包括⑴臨床癥狀（動(dòng)物外觀(guān)；行為；飲食；對刺激的反應；分泌物；排泄物）及體重變化（給藥前和給藥后觀(guān)察期），詳細記錄各項指標盡早發(fā)現毒性反應并反映出指標參數變化與試驗期限的關(guān)系。

③給藥結束后，對主試驗組動(dòng)物進(jìn)行系統的的大體解剖，稱(chēng)重主要臟器并進(jìn)行組織病理學(xué)檢查出具完整的病理學(xué)檢查報告。

生殖毒性試驗[生育力與早期胚胎發(fā)育毒性試驗(生殖I段)、胚胎-胎仔發(fā)育毒性試驗（生殖II段）]

I.定義：指研究藥物對哺乳動(dòng)物生殖功能和發(fā)育過(guò)程的影響，包括I段：一般生殖毒性試驗，II段：致畸敏感期試驗和III段：圍產(chǎn)期毒性試驗。

I段：一般生殖毒性試驗：是研究從交配前受孕再到著(zhù)床，藥物對生育力與早期胚胎發(fā)育的毒性試驗評價(jià)藥物對動(dòng)物生殖的毒性和干擾作用。

II段：致畸敏感期試驗：指妊娠動(dòng)物從胚胎著(zhù)床到胚胎主要器官形成和到妊娠終止，評價(jià)藥物對妊娠動(dòng)物，胚胎和胎仔發(fā)育的影響。

III段：圍產(chǎn)期毒性試驗：指胎仔出生到離乳再到性成熟，評價(jià)妊娠動(dòng)物較非妊娠增強的毒性，出生前后子代的死亡，發(fā)育和功能缺陷的情況。

II.目的：預測藥物可能產(chǎn)生的對生殖細胞和受孕，妊娠，分娩和哺乳等親代生殖功能的不良影響，以及對子代胚胎-胎兒發(fā)育，出生后發(fā)育的不良影響。

III.動(dòng)物要求：通常采用與其他毒理試驗相同的種屬，利于與其他結果進(jìn)行比對，一般至少采用一種動(dòng)物，嚙齒類(lèi)常用大鼠，非嚙齒類(lèi)常用于家兔，選用動(dòng)物需是年輕，性成熟，雌性動(dòng)物需未經(jīng)產(chǎn)。（對試驗動(dòng)物的要求是與人類(lèi)接近，體型小，繁殖快，價(jià)廉，妊娠期短，產(chǎn)仔數多）

IV.試驗設計：

①試驗一般設三個(gè)劑量組和一個(gè)溶劑對照組。

②給藥原則與臨床擬用一致。

③通常孕鼠不少于20只。

④高劑量應出現一些輕微的母體毒性反應或最大耐受量，低劑量應為未觀(guān)察到臨床不良反應的劑量水平（NOAEL）。

⑤給藥期：

對于I段雄鼠在交配前4-10周至交配結束，雌鼠在給藥前兩周開(kāi)始給藥至胚胎著(zhù)床（GD6-GD7）。

對于II段，雌鼠雌兔在胚胎著(zhù)床到胚胎主要器官形成（GD6-GD18）。

對于III段，從胚胎主要器官形成到哺乳期結束（GD15-PND18）。
V.試驗內容：

①給藥后按試驗設計采血或組織進(jìn)行分析，研究暴露量與時(shí)間之間關(guān)系。

②在統計給藥后反應，死亡情況，體重飲水飲食的基礎上，統計雄鼠生育率，精仔數量，活動(dòng)能力和畸形率等，雌鼠統計受孕率，妊娠率，著(zhù)床死亡率，產(chǎn)仔，死仔，畸形數以及其子代存活生長(cháng)發(fā)育情況等。

③通常情況下，在進(jìn)行到臨床研究開(kāi)始前需提供生殖毒性I段和II段研究資料，在上市申請時(shí)提供III段研究資料。

免疫原性試驗

安全藥理試驗：中樞神經(jīng)系統研究、心血管系統（犬和猴的遙測和非遙測技術(shù)）、呼吸系統

遺傳毒性試驗

用于檢測通過(guò)不同機制直接或間接誘導遺傳學(xué)損傷的受試物的體內和體外試驗，主要用于預測受試物的致癌性。我國藥品注冊管理辦法對于新藥的致癌性試驗的要求時(shí)：⑴新藥結構與已知的致癌性物質(zhì)有關(guān)，代謝產(chǎn)物與已知的致癌物相似；⑵在長(cháng)毒試驗發(fā)現有細胞毒性作用或能使某些臟器，組織細胞異?；钴S的新藥，以及致突變結果為陽(yáng)性的新藥必須報送致癌試驗資料。由于致癌試驗耗費大量時(shí)間和動(dòng)物資源，只有當確實(shí)需要通過(guò)長(cháng)期動(dòng)物給藥研究人體中藥物暴露所導致的潛在致癌性時(shí)，才進(jìn)行致癌試驗，通常使用大鼠或小鼠。

藥品毒理檢測服務(wù)對象：

醫藥研發(fā)機構、藥廠(chǎng)、醫藥公司、醫院、學(xué)校等。

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